无菌（jun1）室的要求

无菌室的要求（qiú） 
1．工作室应矮小、平整，面积只需4米2左（zuǒ）右，高2.2―2.3米（mǐ），内部装修应平（píng）整、光滑（huá），无凹凸不平或棱角等，四壁及屋顶应用不透水之材质，便于擦洗及（jí）杀菌 
2．室内采光（guāng）面积（jī）大（dà），从室外应（yīng）能看到室内情况。 
3．为保证无菌室的洁净，无菌室周围需设缓冲走廊，走廊旁再设缓冲间，其面积（jī）可（kě）小于无菌室。 
4．无菌室、缓（huǎn）冲走廊及缓冲间均设有日光灯及供消（xiāo）毒空（kōng）气用（yòng）紫（zǐ）外灯，杀菌紫外灯离工（gōng）作台以1米为宜 ，其电源开关均应设在室外。 
5．无菌室（shì）与缓冲间进出口应设拉门，门与窗平齐，门缝要封紧，两门应（yīng）错开，以免空气对流造成污（wū）染。 
6．无菌室的使（shǐ）用（yòng）与管理 
（1） 无菌室应保持清洁整齐，室内仅存（cún）放必须的检（jiǎn）验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻（bō）璃铅笔等。不要放与检测无关（guān）的物品 
（2） 室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动（dòng）。 
（3） 每2―3周用2%石炭（tàn）酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌（zhuō）、椅及（jí）地面，然后用3%石炭酸水（shuǐ）溶（róng）液喷雾消毒空气，zui后紫外灯杀菌半小（xiǎo）时 
（4） 定期（qī）检查室内空气无菌（jun1）状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即*消毒灭菌。无菌室（shì）无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马（mǎ）丁培养基（jī）平（píng）板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置（zhì）上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养（yǎng），测细菌总（zǒng）数应置（zhì）37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。细（xì）菌霉（méi）菌总（zǒng）数均不得超过10个为 。 
（5） 无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外（wài）），然后打开紫外灯杀菌30分钟（zhōng），时间一到，关闭紫外灯待用 
（6） 进入无菌室（shì）前，必须于（yú）缓冲间更换消毒过的工作（zuò）服、工作帽及工作鞋。 
（7） 操（cāo）作应（yīng）严格按照（zhào）无菌操作规定进行（háng），操作中少说话，不喧哗，以（yǐ）保持环境的无菌状态。 
器材及场所的（de）灭菌消毒 
微生物检验用器材及场所必须进（jìn）行灭菌或消毒处（chù）理，不同（tóng）的对象（xiàng）采用（yòng）不同的处理方法 
1． 高压（yā）蒸汽灭菌: 工作（zuò）服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一（yī）般采用121℃灭菌（jun1）半小时,当（dāng）然不同的培养基有不同的要求,应分别处理 
2． 火焰灭菌（jun1）： 接种针、接种环（huán）等可直接火焰灭菌 
3． 高温（wēn）干燥灭菌： 各种玻（bō）璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时 
4． 一（yī） 般消毒: 无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行（háng）灭菌，必须（xū）用其他方法进行消毒（dú）处（chù）理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒（dú），工作人员的手也用（yòng）此法进行消（xiāo）毒（dú） 
5． 空气的消毒： 开启紫外灯照射（shè）30―60分钟 即可。

操作要领 
准备工作 
1． 先进行无菌室（shì）空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟 
2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒 
3． 操作人员必须将手（shǒu）清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋（xié），才能（néng）进入无（wú）菌室 
4． 进入无菌室后再一次消毒（dú）手部，然后才进行检验操作
操作过程注（zhù）意事项 
1． 动作要轻（qīng），不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻（qīng）取轻放，以免破损（sǔn）污染环境 
2． 操作（zuò）应在近火焰区进行。 
3． 接种环、接种针等金（jīn）属器材使用前后均需（xū）灼烧，灼烧时先通过内（nèi）焰，使残物烘干后再灼烧灭菌 
4． 使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸（xī）管，而必须用洗（xǐ）耳球操作。 
5． 观（guān）察平（píng）板时不好开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操（cāo）作，平皿盖也不能 大开，而是上下盖适（shì）当开缝。 
6． 进行可（kě）疑致病菌涂片染色时，应使用夹（jiá）子夹持玻片，切勿用手直接拿玻片，以（yǐ）免造成污染，用过的玻片也应置于（yú）消毒液中浸泡（pào）消毒，然后（hòu）再洗涤。 
7． 工作结束，收拾好（hǎo）工作台上的样品及器材，zui后用消毒液擦拭工作台。